高壓滅菌的原理是：在密閉的蒸鍋內(nèi)，其中的du蒸汽不能外溢，壓力不斷上升，使水的沸點(diǎn)不斷提高，從而鍋內(nèi)溫度也隨之增加。在0.1MPa的壓力下，鍋內(nèi)溫度達(dá)121℃。在此蒸汽溫度下，可以很快殺死各種細(xì)菌及其高度耐熱的芽孢。

       注意:完全排除鍋內(nèi)空氣，使鍋內(nèi)全部是水蒸氣，滅菌才能徹底。高壓滅菌放氣有幾種不同的做法，但目的都是要排凈空氣，使鍋內(nèi)均勻升溫，保證滅菌徹底。常見的方式是：關(guān)閉閘閥，開關(guān)電源后，當(dāng)工作壓力上升到0.05mpa時(shí)，開啟氣體閘閥，釋放出來氣體，當(dāng)氣壓表偏向零時(shí)，再關(guān)閉閘閥。關(guān)閥再通電后，壓力表上升達(dá)到0.1MPa時(shí),開始計(jì)時(shí)，維持壓力0.1～0.15MPa20分鐘。

       到達(dá)保壓時(shí)間后，即可切斷電源，在壓力降到0.5MPa，可緩慢放出蒸氣，應(yīng)注意不要使壓力降低太快，以致引起激烈的減壓沸騰，使容器中的液體四溢。當(dāng)工作壓力降至零時(shí)，能夠開啟外蓋，清除物質(zhì)，放到服務(wù)平臺上，等候冷疑。在短期內(nèi)內(nèi)，原材料的構(gòu)成產(chǎn)生變化，使化合物不可以歪斜。一旦放置過久，由于鍋爐內(nèi)有負(fù)壓，蓋子打不開，只要將放氣閥打開，大氣壓入，內(nèi)外壓力平衡，蓋子便易打開了。

       對高壓滅菌后不變質(zhì)的物品，如無菌水、栽培介質(zhì)、接種用具，可以延長滅菌時(shí)間或提高壓力。而物質(zhì)應(yīng)嚴(yán)格執(zhí)行保壓時(shí)間，不但要完全保壓，并且要避免物質(zhì)的構(gòu)成惡變或減少實(shí)效性，不可以隨意延長性時(shí)間。操作步驟1．首先將內(nèi)層滅菌桶取出，再向外層鍋內(nèi)加入適量的水，使水面與三角擱架相平為宜。2．放回滅菌桶，并裝入待滅菌物品。注意不要太擁擠，以免蒸汽流通和影響滅菌。三角燒瓶與試管口端均不要與桶壁接觸，以免冷凝水淋濕包口的紙而透入棉塞。3.蓋上并將自然通風(fēng)塑料軟管插進(jìn)殺菌桶的排氣箱。另外以二種對稱性方法扭緊相對性2個(gè)螺栓，使螺栓松脫一致，不滲水。4．用電爐或煤氣加熱，并同時(shí)打開排氣閥，使水沸騰以排除鍋內(nèi)的冷空氣。當(dāng)強(qiáng)冷空氣徹底排出來時(shí)，關(guān)掉自動放氣閥，隨蒸氣壓力更改鍋內(nèi)溫度。當(dāng)鍋內(nèi)的壓力升至需要的壓力時(shí)，操縱熱源并將壓力保持到需要的時(shí)間。試驗(yàn)選用1.05kg/cm2、121.3c、20min殺菌。5．滅菌所需時(shí)間到后，切斷電源或關(guān)閉煤氣，讓滅菌鍋內(nèi)溫度自然下降，當(dāng)壓力表的壓力降至0時(shí)，打開排氣閥，旋松螺栓，打開蓋子，取出滅菌物品。如果壓力未降到0時(shí)，打開排氣閥，就會因鍋內(nèi)壓力突然下降，使容器內(nèi)的培養(yǎng)基由于內(nèi)外壓力不平衡而沖出燒瓶口或試管口，造成棉塞沾染培養(yǎng)基而發(fā)生污染。6.在37℃熔融二十四小時(shí)后，可應(yīng)用無菌檢測培養(yǎng)液。