高壓蒸氣法是一種迅速而有效的方法。使用高壓蒸氣器，利用加熱產(chǎn)生蒸氣，隨著蒸氣壓力不斷增加，溫度隨之升高，通常壓力在103.4kPa(相當(dāng)舊制的15磅/吋 2 或1.05kg/cm 2 )時，器內(nèi)溫度可達(dá)121.3℃，維持15～30min，可殺滅包括芽胞在內(nèi)的所有微生物。此法常用于一般培養(yǎng)基、生理鹽水、手術(shù)器械及敷料等耐濕和耐高溫物品。 大型蒸汽滅菌器的注意事項：

無菌包不宜過大(小于50cm×30cm×30cm)，不宜過緊，各包裹間要有間隙，使蒸汽能對流易滲透到包裹中央。消毒前，打開貯槽或盒的通氣孔，有利于蒸汽流通。而且排氣時使蒸汽能迅速排出，以保持物品干燥。消毒完畢，關(guān)閉貯槽或盒的通氣孔，以保持物品的無菌狀態(tài)。

二，布類物品應(yīng)放在金屬類物品上，否則蒸汽遇冷凝聚成水珠，使包布受潮。阻礙蒸汽進(jìn)入包裹中央，嚴(yán)重影響效果。

三，定期檢查效果。經(jīng)高壓蒸汽的無菌包、無菌容器有效期以1周為宜。高壓蒸汽效果的監(jiān)測：有以下三種方法。

工藝監(jiān)測，又稱程序監(jiān)測。根據(jù)安裝在器上的量器(壓力表、溫度表、計時表)、圖表、指示針、報警器等，指示設(shè)備工作正常與否。此法能迅速指出器的故障，但不能確定待物品是否達(dá)到要求。此法作為常規(guī)監(jiān)測方法，每次均應(yīng)進(jìn)行。

第二種是化學(xué)指示監(jiān)測。利用化學(xué)指示劑在一定溫度與作用時間條件下受熱變色或變形的特點，以判斷是否達(dá)到所需參數(shù)。常用的有：

自制測溫管：將某些化學(xué)的晶體密封于小玻璃管內(nèi)(長2cm,內(nèi)徑1～2mm)制成。常用試劑有苯甲酸(熔點121-123℃)等。當(dāng)濕度上升至的熔點，管內(nèi)的晶體即熔化，事后，雖冷卻再凝固，其外形仍可與未熔化的晶體相區(qū)別，此法只能指示溫度，不能指示熱持續(xù)時間是否已達(dá)標(biāo)，因此是低標(biāo)準(zhǔn)。主要用于各物品包裝的中心情況的監(jiān)測。

3M壓力指示膠帶：此膠帶上印有斜形白色指示線條圖案，是一種貼在待的無菌包外的特制變色膠紙。其粘貼面可牢固地封閉敷料包、金屬盒或玻璃物品，在121℃經(jīng)20分鐘，130℃經(jīng)4分鐘后，膠帶100%變色(條紋圖案即顯現(xiàn)黑色斜條)。3M膠帶既可用于物品包裝表面情況的監(jiān)測，又可用于對包裝中心情況的監(jiān)測，還可以代替別針，夾子或帶子使用。

第三種是生物指示劑監(jiān)測。利用耐熱的非致病性細(xì)菌芽胞作指示菌，以測定熱力的效果。菌種用嗜熱脂肪桿菌，本菌芽胞對熱的抗力較強，其熱死亡時間與病原微生物中抗力強的肉毒桿菌芽胞相似。生物指示劑有芽胞懸液、芽胞菌片以及菌片與培養(yǎng)基混裝的指示管。檢測時應(yīng)使用標(biāo)準(zhǔn)試驗包，每個包中心部位置生物指示劑2個，放在柜室的5個點，即上、中層的中央各一個點，下層的前、中、后各一個點。取出生物指示劑，接種于溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基中，置55-60℃溫箱中培養(yǎng)48小時至7天，觀察結(jié)果。若培養(yǎng)后顏色未變，澄清透明，說明芽胞已被殺滅。達(dá)到了要求。若變?yōu)辄S色混濁，說芽胞未被殺滅。

產(chǎn)品的無菌保證并不能依賴于終產(chǎn)品的無菌檢驗，而是取決于生產(chǎn)過程中采用合格的工藝、嚴(yán)格的GMP管理和良好的全面質(zhì)量保證體系。工藝的制定確定應(yīng)綜合考慮其被物品的性質(zhì)、方法的有效性、和經(jīng)濟(jì)性及、產(chǎn)品物品的完整性和穩(wěn)定性等因素。

程序的驗證是無菌保證的重要內(nèi)容必要條件。對產(chǎn)品(包括終容器及包裝)而言，；方法在實際應(yīng)用前必須對其程序經(jīng)進(jìn)行驗證后，方可交付正式使用。驗證內(nèi)容包括：

⑴撰寫確定驗證方案及制定評估標(biāo)準(zhǔn)。

⑵確認(rèn)設(shè)備技術(shù)資料齊全、安裝正確,并能處于正常運行（安裝確認(rèn)）。

⑶確認(rèn)關(guān)鍵控制設(shè)備和儀表能在規(guī)定的參數(shù)范圍內(nèi)正常工作運行（運行確認(rèn)）。

⑷采用物品或模擬物品進(jìn)行重復(fù)試驗，提供各參數(shù)范圍，確認(rèn)效果符合規(guī)定（性能確認(rèn)）。

⑸匯總并完善各種文件和記錄，撰寫記錄完整的驗證報告。

日常生產(chǎn)中，應(yīng)對過程程序的運行情況進(jìn)行監(jiān)控，確認(rèn)過程中各關(guān)鍵參數(shù)（如溫度、壓力、時間、濕度、氣體濃度及吸收的輻照吸收劑量等）均在驗證確定的范圍內(nèi)。已采用的程序中關(guān)鍵的設(shè)備和工藝應(yīng)定期進(jìn)行再驗證。當(dāng)程序發(fā)生較大變化發(fā)生變更時，（包括柜中物品放置裝載方式和數(shù)量發(fā)生的改變）時，應(yīng)進(jìn)行重新再驗證。